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elisa測(cè)定試劑盒檢測(cè)注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):520 更新時(shí)間:2018-02-26

elisa測(cè)定試劑盒檢測(cè)注意事項(xiàng)
Q1:為什么所有試劑和檢測(cè)樣本要平衡至室溫后再進(jìn)行加樣操作?
A1:溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應(yīng),實(shí)驗(yàn)前務(wù) 必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測(cè)樣本。避免因溫度的動(dòng)力學(xué)反應(yīng)差異而導(dǎo)致ELISA檢測(cè)結(jié) 果的不準(zhǔn)確。
Q2:為什么標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性較差?
A2:按照推薦方式保存標(biāo)準(zhǔn)品;溶解標(biāo)準(zhǔn)品之前需短暫離心,*收集粉末;確保標(biāo)準(zhǔn)品* 溶解和混勻(大約10min),然后再進(jìn)行后續(xù)的系列稀釋步驟,確保每一步都充分混勻且 移液;顯色的恰當(dāng)終止;選擇合適的數(shù)學(xué)擬合方程繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
Q3:ELISA實(shí)驗(yàn)為什么必須設(shè)置復(fù)孔?
A3:為獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,強(qiáng)烈建議標(biāo)準(zhǔn)品及樣本進(jìn)行復(fù)孔檢測(cè)。 因?yàn)閺?fù)孔檢測(cè)可以:
★計(jì)算平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確;
★解決實(shí)驗(yàn)中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;
★計(jì)算CV值,對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作和試劑盒的精密度進(jìn)行評(píng)估。
Q4:為什么實(shí)驗(yàn)過(guò)程中孵育、洗滌需要振蕩?如何振蕩?
A4:振蕩孵育使反應(yīng)更充分,振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)96孔微孔板振蕩器。 孵育過(guò)程振蕩,可以加快、加強(qiáng)抗原抗體間的相互碰撞接觸,使得反應(yīng)過(guò)程更加*,OD值通 常會(huì)比未振蕩孵育的結(jié)果要高;洗滌過(guò)程振蕩,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景 值,同時(shí)可以提高試劑盒檢測(cè)的靈敏度。
Q5:何時(shí)終止ELISA反應(yīng)?
A5:ELISA實(shí)驗(yàn)zui終需要酶催化底物顯色反應(yīng)來(lái)完成,在zui合適的時(shí)間終止反應(yīng)是ELISA實(shí)驗(yàn)成 功的重要因素。在HRP-TMB酶反應(yīng)系統(tǒng)中,當(dāng)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色不再變深,倒數(shù)2-3個(gè)濃度標(biāo) 準(zhǔn)品顏色開(kāi)始有淺藍(lán)色時(shí),便需要終止反應(yīng);或者也可以根據(jù)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品孔在620nm的OD 值來(lái)決定,OD620=0.9-0.95之間時(shí)即可終止。
Q6:為什么酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)必須選用雙波長(zhǎng)?
A6:首先,酶標(biāo)儀使用前務(wù)必預(yù)熱10-15min,使測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。其次,ELISA實(shí)驗(yàn)采用雙波 長(zhǎng)測(cè)定吸光度,可以排除單波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)的測(cè)定干擾(標(biāo)本的濃度,干擾色等)。一般采用zui大 波長(zhǎng)作為參照波長(zhǎng),在參照波長(zhǎng)下,檢測(cè)物的吸光值z(mì)ui小,檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差 可以消除非特異性吸收;因此,雙波長(zhǎng)測(cè)定,可zui大限度的消除指紋、雜質(zhì)及不透光的物質(zhì)對(duì) 酶標(biāo)儀讀數(shù)帶來(lái)的誤差,以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。
elisa測(cè)定試劑盒小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅩ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅨ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅧ-Ag ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅧ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅦ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅵ(FⅥ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅥ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅴ(FⅤ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅤ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅳ(FⅣ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅣ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅢ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅡ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅰ(FⅠ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FⅠ ELISA Kit
小鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒    ,英文名:    F1+2 ELISA Kit
小鼠凝血酶受體(TR)ELISA試劑盒    ,英文名:    TR ELISA Kit
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒    ,英文名:    TAT ELISA Kit
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒    ,英文名:    Gelsolin ELISA Kit
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒    ,英文名:    ALB ELISA Kit
小鼠尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    UPP1 ELISA Kit
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒    ,英文名:    PLAUR/uPAR ELISA Kit
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒    ,英文名:    uPA ELISA Kit
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒    ,英文名:    visfatin ELISA Kit
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒    ,英文名:    vaspin ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒    ,英文名:    EL ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒    ,英文名:    eNOS-3 ELISA Kit
elisa測(cè)定試劑盒

 

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